抗核抗体(ANA)与抗核抗体谱

　　弥漫性结缔组织病（多属于自身免疫病）的一个重要特点是血清中出现自身抗体，其中最常见且与疾病关系最密切的是抗核抗体（ANA）。ANA包含一组自身抗体，无种属和器官特异性，见于多种疾病，缺乏特异性。在自身免疫性疾病中，细胞核常成为自身免疫反应的靶子。ANA主要是指对核内成分所产生的抗体，此外也包括对核内成分相同的物质所产生的抗体。所以，ANA是抗核酸抗体和抗核蛋白抗体的总称。通常是7sIgG，但也可以是19sIgM。

　　抗核抗体的检测方法：目前临床最常用的抗核抗体的检测方法是“间接免疫荧光抗核抗体（IFANA）检测”，正常人为阴性。以血清稀释度大于1:6以上判定为阳性。

　　抗核抗体的核型：ANA的核型有一些临床参考价值。某种核型可能伴有某种特定的ANA和风湿病，但这种关联是不可靠的，况且当血清中含有多种抗体时，随血清稀释度不同，可能会表现不同核型。核型的价值大部分被测定特异抗体所代替。 但熟知核型的基本临床意义仍然是风湿科医师的基本功之一。

　　ANA荧光染色分型见附表。其中常见的有以下几种：①均质型：核质染色均匀一致，此型与抗组蛋白抗体和抗DNA抗体有关；②颗粒型（斑点型）：核质染色呈斑点状，核膜存在，此型多与可溶性核抗原（ENA）抗体有关，多见于混合型结缔组织病。③核周（核膜）型：即周边型。荧光包绕在核膜周围，多与抗双链DNA抗体有关，主要见于累及肾脏的SLE患者，且和疾病的活动性明显有关，缓解期以均质型多见。④核仁型：仅核仁染色，与4～6sRNA抗体有关，在系统性硬化症中较常见 ，也可见于口和眼干燥及关节综合征等。⑤着丝点型：处于分裂时相的Hep-2细胞为底物可出现依着丝点散在排列的特殊点状圆形，与斑点型的区别是前者核膜消失。

间接免疫荧光抗核抗体（IFANA）检测的核型与临床意义　

间接免疫荧光抗核抗体（IFANA）检测的临床意义：

（1）SLE：约99%（86%～100%）的活动期SLE病人ANA阳性，其滴度也常>1:80，但它的特异性差。对于未经治疗的疑似患者，多次检查抗核抗体，若结果阴性，应考虑其他疾病的可能。ANA阳性本身不能确诊任何疾病，但ANA阳性且伴有特征性狼疮症状则支持狼疮诊断。ANA阴性几乎可除外SLE的诊断。但应注意有5%的SLE病人ANA可为阴性，这其中大部分为抗SSA抗体、抗SSB抗体阳性，因为测定ANA通常用鼠肝或鼠肾做底物，而这些组织核内含SSA、SSB、Jo-1、rRNP抗原相对较少，所以不易测出其相应抗体。可加做人喉癌上皮细胞为底物的方法进行检测。

有人认为效价滴度可作为反映病情的参考指标。由于抗脱氧核糖核蛋白因子，尤其是抗脱氧核糖核酸因子与病情活动性有关，当病性好转或用大量皮质激素治疗后，其滴度下降甚至完全消失。一般说来抗核抗体滴度的高低大多数与病性的好转，恶化是平行的。 即认为ANA在狼疮活动期阳性率和滴度均增高，在缓解期阳性率和滴度均减低。但总的来说ANA抗体阳性与疾病的活动相关性不大。

（2）其他结缔组织病：可见于盘状红斑性狼疮、皮肌炎、类风湿 关节炎、硬皮病、干燥综合征、血管炎等。在非狼疮性结缔组织病中，ANA阳性率为50%，ANA作为自身免疫性结缔组织疾病的筛选试验必须强调中高滴度。

（2）正常人 ：只有少数ANA阳性。一般当血清稀释度1:4时，男性有3%阳性，女性有7%阳性，而80岁以上健康老年人阳性率可达49%。

（3）其他疾病：消化系疾病（如慢活肝、溃疡性结肠炎）、造血系统疾病（如巨球蛋白血症、淋巴瘤、特发性自身免疫性溶血性贫血、恶性贫血）、感染性疾病、 原发性肺纤维化、恶性肿瘤、重症肌无力、结核病等。这类疾病的滴度往往较低。

（4）药物反应：服用某些药物如普鲁卡因酰胺、三甲双酮、肼苯哒嗪、苯妥英钠、异烟肼、磺胺类、保泰松、对氨基水杨酸等均可出现ANA阳性。但停药后即降至正常水平。

需强调的是：由于某些原因ANA可呈假阳性和假阴性。ANA主要用于自身免疫性结缔组织病的筛选试验，因为低滴度的ANA可在感染、肿瘤及正常人中出现，未加稀释的正常人血清约1/3也可呈阳性反应，一般滴度在1：40以上应考虑结缔组织病可能，ANA>1：80有较大临床意义。

抗核抗体的分类

　　自身抗体：自身抗体是指抗自身细胞内、细胞表面和细胞外抗原的免疫球蛋白。抗细胞内抗原的抗体包括：1、抗细胞核成分的抗体（抗核抗体）。2、抗细胞浆内成分的抗体（抗中性粒细胞及其他细胞胞浆抗体、抗线粒体抗体、抗核糖体抗体等）。3、抗细胞表面抗原的抗体。抗细胞外抗原的抗体包括：类风湿因子、抗甲状腺球蛋白抗体等。

　　间接免疫荧光抗核抗体（IFANA）检测是的抗核抗体包含一组自身抗体，缺乏特异性。所以有必要对 某种特定的ANA进行检测。目前临床已能检测多种特定的抗核抗体。这些特定的抗核抗体可分为以下几类：

(1)以首次检出这种抗体的疾病命名，如抗SSA抗体、抗SSB抗体就是首先从干燥综合征中检出的抗体。

(2)以首次检出这种抗体的病人名字的前两个字母命名，如抗Sm抗体，抗Jo-1抗体等。

(3)按抗原在细胞的位置命名，如抗中性粒细胞胞浆抗体，抗着丝点抗体等。

(4)按抗原的化学组成命名，如抗DNA抗体、抗核糖核酸蛋白(RNP)抗体等。之所以有这么多种命名方法，是因为大部分抗原的化学组成尚不清楚，随着抗原化学组成的不断阐明，将会有更多的抗核抗体按抗原的化学组成命名。

ANA也可根据细胞内各分子的理化特性和分布部位主要分为以下四大类：

1.抗DNA抗体：又可分为单链（变性）和双链（天然）DNA抗体：①抗单链DNA（ssDNA）抗体:在多种疾病中及正常人血清中存在，无特异性，临床价值不大。②抗双链DNA（dsDNA抗体）：对诊断SLE有较高的特异性，且与SLE的活动相平行，并可作为治疗的估价。随着疾病活动的控制，抗dsDNA抗体滴度可以下降或消失。抗dsDNA抗体与DNA结合成为免疫复合物在肾小球基底膜沉积，或抗dsDNA抗体直接作用于肾小球抗原造成SLE患者的肾损害。抗dsDNA抗体阳性的患者较阴性患者发生肾炎的危险性高12倍。测定抗dsDNA抗体的方法很多，其中放射免疫法（Farr）敏感，用此法检测其结合率320％为 阳性，短膜虫或马疫锥虫为底物的间接免疫荧光法（IF－CT或IF－TE）更特异，此法31：5可判阳性。低滴度的抗DNA抗体也可在多种疾病甚至正常中人出现。

　　抗DNA抗体的检测与意义：有的ANA可以作为一种疾病的标记，如SLE中的抗Sm抗体，干燥综合征(SS)中的抗SSB抗体，系统性硬皮病(PSS)中的抗Scl-70抗体。因此，如能测出是哪一种抗体，则对疾病的诊断有很大的帮助。系统性红斑狼疮患者血清中可发现3种类型的抗DNA抗体，即：抗单股DNA（ss-DNA）、抗双股DNA（ds-DNA）和能与ss-DNA及ds-DNA均起反应的抗体。 临床主要检测前二种。 一般正常人结合率在10%以下，超过20%可认为产阳性，SLE可达50%以上。类风湿关节炎、慢性肝炎有时亦达20%～30%。 (1)抗ds-DNA抗体：即抗双链（天然）DNA抗体。高浓度的抗ds-DNA抗体几乎仅见于SLE，所以，抗ds-DNA对SLE来说，几乎是特异性的。且抗ds-DNA抗体与疾病活动度、特别是与活动性狼疮性肾炎密切相关，可以用来作为系统性红斑狼疮诊断和疗效观察的一项指标。在SLE缓解期抗DNA抗体可转阴或滴度减低，因此单次测定结果阴性，不能除外SLE。(2)抗ss-DNA抗体：即抗单链（变性）DNA抗体。它不仅存在于SLE病人中，也可以存在于非SLE的其他疾病中，包括炎症性疾病、慢性活动性肝炎、药物性SLE、硬皮病等。虽然它在致病性方面与抗ds-DNA相同，但特异性差，对SLE诊断价值较小。

2.抗组蛋白抗体：抗组蛋白抗体采用ELISA检测，可以在多种自身免疫性结缔组织病中出现，其中药物性狼疮的阳性率达90％以上，抗组蛋白抗体的滴度在服用异烟肼和SIE患者中最高。抗组蛋白抗体具有H1、H2A、H2B、H3和H4四个亚单位，不同的药物所致的抗组蛋白的亚单位抗体不同。

3.抗非组蛋白抗体：①抗ENA（Extractable Nuclear Antigen）抗体：此组抗体可以溶于盐水而被提取，对弥漫性结缔组织病的诊断尤为重要，但与疾病的严重程度及其活动度无明显关系。②抗着丝点抗体：抗原是染色体粒区的17KD、80KD和140Kd的蛋白。80％的CREST（软组织钙化、雷诺现象、食道功能障碍、指端硬化、毛细血管扩张）综合征有此抗体。此抗体与雷诺现象、皮肤硬化相关。

4.抗核仁抗体：抗原是核仁内分子量为210KD－211KD的RNA多聚酶、分子量为30KD的原纤维和与7－2、8－2RNA形成复合物的40KD蛋白TO/Th.抗核仁抗体与SSC有关。

特定的抗核抗体分类表

常见风湿病的抗核抗体谱阳性率